成大醫院臨床醫學研究中心電子報

第十五期 2025.9

 

研究服務公告 – 論文與計畫諮詢服務

主題介紹– 倒立與水平對射式雙收光片層光顯微鏡

臨醫中心活動公告

核心/共同實驗室教育訓練課程

院外計畫徵求訊息

學研活動相關訊息

 

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研究服務公告

論文與計畫諮詢服務

               在醫學研究的道路上，如何把心中縝密的構想，化為一篇能被國際期刊接納的佳作？成大醫院臨床醫學研究中心提供的 「論文與計畫諮詢」服務，陪你一起把靈感化為高品質的論文與計畫。目前中心共有三位博士級研究員與一位研究型主治醫師，研究範疇涵蓋轉譯醫學至臨床研究，協助研究人員突破論文撰寫與研究規劃上的瓶頸。

提供服務項目如下：

* 研究架構建立

* 實驗設計

* 資料分析

* 圖表製作

* 英文潤飾

* 投稿相關問題諮詢

* 資料庫分析與應用

週一至週五皆有研究人員輪值，提供即時、專業的諮詢服務。

院內專任助理教授(不含)以下之醫師與醫事人員，每年還可享有一次免費諮詢機會！

聯絡資訊：

李青記醫師  Email: chichingbm85@yahoo.com.tw ; 手機59136或分機6058

李宜珍博士 Email: ryichenli@gmail.com ; 分機4207

林思賢博士 Email: taiwan2trr@gmail.com ; 分機6055

蘇鈺筑博士 Email: yc05018@gmail.com ; 分機6054

更多詳細資訊請參考臨醫中心網頁 (臨醫中心→諮詢預約→論文與計畫諮詢)。

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主題介紹

生醫光學影像核心平台自即日起至 9/30(一)推出特定儀器半價優惠。本期電子報特別介紹「倒立水平對射式收光片層光顯微鏡」，誠摯邀請同仁踴躍使用。

倒立與水平對射式雙收光片層光顯微鏡Light Sheet Fluorescence Microscopy (LSFM)：

帛新企業股份有限公司  高級專員 簡正倫先生

        2014年諾貝爾化學獎頒發予三位在超高解析影像有著卓越貢獻的學者，也藉此機會讓顯微影像領域重視起層光螢光顯微影像技術 (Light Sheet Fluorescence Microscopy, LSFM) 的優勢。經由一連串光學鏡組，將雷射壓縮成薄平面，對樣本進行三度空間掃描，由於雷射投射方向與螢光訊號擷取方向是垂直的，所以大幅降低光漂白、光毒害的缺點，並於光學技術上增進空間解像力。(圖一)

 

圖一: 層光螢光顯微影像技術中雷射投射方向 (藍色標示) 與螢光訊號擷取方向 (紅色標示) 垂直。

               由於雷射投射方向與一般顯微鏡光路架構不同，所以層光螢光顯微影像技術突破以往在樣本製備上的厚度限制，舉凡單層細胞培養、3D培養、Spheroid、斑馬魚、果蠅胚胎……均適用層光螢光顯微影像技術掃描。與雷射共軛焦顯微影像的差異可由樣本厚度、光毒害程度、造影速度以及空間解像力等層面來進行比較。

 

使用倒立與水平對射式雙收光片層光顯微鏡所拍攝影像

利用三維以及球體培養技術能更貼近細胞於體內生長微環境，模擬真實的細胞間相互作用機制探討，腫瘤細胞、幹細胞、再生醫學、藥物篩檢……等越來越多領域都趨向三維空間研究模式的建立。

        然而，一般的光學顯微設備受限於載物台大小、方向及角度，觀察鏡頭的工作距離、倍率及解像力，照射光源的穿透性、光毒害及飽和度……等種種因素，故僅適用二維細胞培養樣本；層光顯微鏡的光路設計由於沒有光點擴散效應，因此具有提供比共軛焦影像更細微的三軸空間解像力。藉由層光顯微鏡能讓您的三維培養細胞、球體細胞等樣品得到穩定的長時間活細胞三維記錄。

以下為應用實例：

 

立體細胞球體觀測 在三維培養環境中觀察小鼠胚胎幹細胞的分化過程時，傳統倒立式光學顯微鏡常受限於高倍率鏡頭的工作距離過短，導致無法精準對焦，只能觀測球體表層而難以獲取深層訊號。此外，長時間高能量光照易誘發ROS產生並造成細胞死亡。相比之下，層光顯微鏡能完整呈現球體內所有細胞的分化情形，並可持續追蹤細胞間的交互作用。

小鼠胚胎幹細胞細胞膜 (綠色)與細胞核(紅色)位置   神經細胞發育觀測 在神經細胞發育過程中，星狀細胞扮演關鍵角色，並與神經細胞產生多層次交互作用。層光顯微鏡的雷射入射方式與照射面積與傳統光學顯微鏡不同，能有效降低光毒性與光漂白，並順利照射至較深層區域，獲取完整的軸向影像。其快速造影特性可捕捉螢光分子的動態變化，縮短光能量在細胞內的停留時間，並清晰呈現細胞在三維空間中的相對位置。

星狀細胞 (綠色) 以及神經細胞 (紅色) 共同培養的球體     胚胎發育過程的長時間追蹤 為長時間記錄胚胎發育過程中的細胞變化、排列及特定細胞的角色，果蠅胚胎需置於洋菜膠中培養。傳統光學顯微鏡僅能透過解剖顯微鏡進行觀測，但其倍率不足以解析至細胞或亞細胞層次。層光顯微鏡則因光路設計適合厚樣本，可穩定且精確地追蹤胚胎發育過程中細胞移動走向及特定細胞的角色。

果蠅胚胎外殼蛋白 (綠色) 以及細胞核 (紅色)   新生小鼠耳蝸三維組織觀測 傳統光學顯微鏡多仰賴組織固定、切片與染色，以獲取病理解剖影像。然而，對於厚度約 300–400 µm 的新生小鼠耳蝸組織，層光顯微鏡可直接觀測其毛細胞群在三維空間中的排列，並進一步記錄其生理反應變化，提供更貼近真實情境的研究結果。

小鼠耳蝸毛細胞(黃色螢光)   細胞於奈米材料上的分布觀測 層光顯微鏡也可應用於生物材料的研究上。如將攜帶紅色螢光蛋白的犬腎小管上皮細胞培養於水膠一天後，利用層光顯微鏡分別從Z軸與XY軸成像，顯示細胞均勻分布於水膠內，並成功重建水膠載體包覆細胞的三維立體結構。此研究成果已於 Materials Today Bio（IF: 10.2, 2024年6月）發表。

以Z軸(上圖)與XY軸(下圖)拍攝影像顯示犬腎小管上皮細胞(紅色螢光)在水膠內分布的情形   儀器技術諮詢：生醫光學影像核心平台 王雪君博士 (分機3115) =============================================================================

臨醫中心活動公告

【論文獎勵公告】依據113年10月17日成附醫臨醫字第1131500015號函公告，自2025年1月1日起調整部分期刊論文獎勵發放金額如下：(1) 第一類期刊(MDPI、Frontiers Media、Baishideng Publishing Group、OMICS Publishing Group)分為兩階段：2025年1月1日起投稿之論文，獎勵金*30%；2025年7月1日起投稿之論文則停發獎勵金；(2) 2025年1月1日起投稿在「類別二加強實質審查期刊名單」則由獎金*50%修訂為獎勵金*30%，並將BMC系列期刊列入此類。

【演講公告1】114/9/16(二)12:30-14:00，邀請中央研究院資訊科技創新研究中心曹昱研究員演講，講題為AI技術促進口語溝通：輔助科技的突破，演講地點為醫學院2樓第四講堂。

【演講公告2】114/9/24(三)12:20，邀請中央研究院基因體研究中心陳緯助研究員演講，講題為Nano- and Bio- Materials-enabled Drug Delivery Technologies for Atherosclerosis and Cancer Therapy，演講地點為門診大樓7樓7027教室。

【演講公告3】114/9/24(三)17:10，邀請台灣大學藥學系程吉安助理教授演講，講題為Small Packages, Big Impact: The Next Wave of Extracellular Vesicle Research Innovations，演講地點為門診大樓7樓7027教室。

【演講公告4】114/10/18(六)08:30，舉辦「國科會計畫申請經驗分享座談會」，會議地點為醫學院第二講堂。

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核心/共同實驗室教育訓練課程

近期儀器訓練課程:

    生醫光學影像核心平台網頁報名 (https://bioimage.med.ncku.edu.tw/index.php?modify=course)

      9月   9日   自動化活細胞影像系統暨多功能光學檢測儀(Cell discoverer) 儀器使用認證課程

      9月   9日   單細胞離子影像分析儀(Single cell fluorimeter) 儀器使用認證課程

      9月   9日   HIVE高速科研數據處理系統使用認證課程

      9月   9日   倒立與水平對射式雙收光片層光顯微鏡(Light sheet) 儀器使用認證課程

      9月15日   倒立式共軛焦顯微影像系統(FV4000)儀器使用認證課程

      9月16日   倒立式共軛焦顯微影像系統 Confocal laser scanning microscope (FV1000) 與

                          正立式多光子顯微影像系統Multi-photon laser scanning microscope (MPE)

      9月26日   高通量螢光顯微藥物開發系統(C-HTS)儀器使用認證課程

      9月26日   高解析度活細胞螢光影像系統(Delta-Vision) 儀器使用認證課程

      9月26日   超高解析度光學影像系統(Super-Resolution) 儀器使用認證課程

臨醫中心網頁報名 (https://crc.hosp.ncku.edu.tw/index.php?modify=course)

      9月   3日     海馬生物能量測定儀基礎應用課程講解及實機訓練課程

      9月   4日     多功能及時核酸序列分析系統(PyroMarkQ24) 儀器使用認證課程

      9月   9日     iBrightTM FL1000 影像系統儀器使用認證課程

      9月 11日     多功能影像分析系統(FluorChem R) 儀器使用認證課程

      9月 12日     ABI StepOnePlus Real-Time PCR儀器使用認證課程

      9月17日     Thermo石蠟包埋機、石蠟切片機、細胞離心機之實機訓練課程

      9月 19日     全景組織體細胞定量分析儀實機操作示範與認證課程

      9月 26日     NIS活細胞長時間影像系統儀器使用認證課程

 

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院外計畫徵求訊息

【國科會】國科會與匈牙利科學院(HAS)共同徵求2026-2027年臺匈(NSTC-HAS)雙邊合作研究人員交流互訪計畫，申請日期自即日起至民國114年9月26日(五)上午10:00前完成線上申請作業。

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學研活動相關訊息

2025臺灣粒線體醫學暨研究學會學術研討會暨年會；114年10月18日(六)於國立清華大學生命科學院華生演講廳舉辦。

國衛院 30 週年院慶特別企劃 – 亞洲首場AACR ON CAMPUS，台北場次114年11月1-2日(六-日)於張榮發基金會舉辦；台南場次114年11月5日(三)於國立成功大學成杏廳舉辦。

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敬請同仁於使用臨醫中心資源並發表論文時，於論文致謝欄（Acknowledgement）加註致謝臨醫中心並通知儀器管理員。致謝文句請參考以下範例：We thank the staff of Clinical Medicine Research Center, National Cheng Kung University Hospital for the technical support.