研究範例分享1 - 分離高純度造血幹細胞
造血幹細胞(HSC)具有自我更新(self-renewal)的能力並可以分化成造血系統內的所有細胞,也因此是臨床研究中非常熱門的領域。移植造血幹細胞可治療造血相關的疾病、免疫缺陷及多種白血病。CD34以及CD133是最為熟知的幹細胞表面蛋白,也因此最常用來當作標記以分離或鑑定幹細胞。由於造血幹細胞在周邊血液中的量非常稀少,因此分離出高純度及高存活率的造血幹細胞也非常有挑戰性。以CD34 Microbeads kit UltraPure 從周邊血單核球細胞(PBMC)中分離CD34+ 細胞,並以MACSQuant®進行flow cytometry分析。此結果與使用傳統磁珠抗體的結果相似,不同的是細胞純度可提升至66%左右。
研究範例分享2 - 人源性異種移植腫瘤解離後去除小鼠細胞
人源性腫瘤異種移植(PDXs)是一種非常實用的藥物研發模型,藉由移植患者的腫瘤至小鼠身上,可保留患者腫瘤原本的基因特性以及腫瘤微環境。但培養一段時間後,取出的腫瘤樣本常混雜小鼠的間質細胞,進而干擾下游實驗分析。本次實驗檢體來源為病人的非小細胞肺癌(NSCLC),手術切除後將肺癌組織移植到4-6週大的免疫缺陷小鼠。為了取得PDX腫瘤細胞懸浮液,首先使用Miltenyi Biotec的gentleMACS Octo Dissociator with Heaters組織均質機搭配Tumor Dissociation kit將目標腫瘤解離。隨後使用autoMACS Pro搭配Mouse Depletion Kit標記小鼠細胞,並選擇 ”Depletes” 程式進行細胞分選,達到去除小鼠細胞的目的。將有使用Mouse Depletion Kit分選(B)與未分選的細胞(A)分別進行flow cytometry分析比較,結果顯示在分選之後,檢體中的murine HLA含量大幅下降,表示小鼠細胞已被有效移除,顯示透過細胞分選儀的確可大幅增加細胞純度以利後續實驗進行。